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    2. 枯草芽孢桿菌表達系統構建

      枯草芽孢桿菌表達系統與其他表達系統相比,優勢在于表達宿主本身的非致病性;表達的蛋白不混有內毒素;沒有密碼子偏愛性可以改為沒有明顯的偏愛密碼子;并且擁有一套高效的分泌信號肽及分子伴侶系統,而且在多數情況下,芽孢桿菌分泌的真核來源的重組蛋白具有天然構象和生物活性,避免形成包涵體;表達周期短,蛋白產率高。

      目前用芽孢桿菌系統成功表達的真核基因產物有白介素-3(IL-3)、乙肝核心抗原、乙肝PreS2抗原、丙肝病毒殼蛋白、HIV p4Ispf-1蛋白等;成功表達的原核基因產物有甘油-3-磷酸脫氫酶、甘油激酶、纖維素酶、色氨酸合成酶等。

      本公司可以根據客戶需求進行載體改造和宿主菌改造,或者采用商業化的載體(pHT43載體,配套菌WB800或WB800N),可以提供胞內或胞外、組成型或誘導型的表達;可以提供GST、His、HA,Flag、myc、MBP等標簽。

      服務內容:
      1、亞克?。簛喛寺≈羶蓚€適當的表達載體中,制備大量質粒,構建線性化載體。
      2、表達條件優化及評估:將線性載體轉化至適合的寄主菌株中,通過PCR方法確定陽性轉化株,表達條件優化及確認——確定培養基及誘導濃度,SDS-PAGE以及Western blot分析。
      3、蛋白表達及純化:少量表達,純度達90%以上。
      服務價格及周期:

      服務編號 服務項目 服務周期
      S2002-1 蛋白枯草芽孢表達載體的構建(參見基因克隆部分) 2-3周
      S2002-2 蛋白枯草芽孢桿菌表達載體轉化到宿主菌 2-4周
      S2002-3 蛋白表達條件的優化 2-3周
      S2002-4 蛋白表達及純化(85%純度的蛋白200ug ) 1周

      載體選擇:

      編號 載體名稱 載體抗性 表達菌 表達類型
      1 pWB980-ori 卡那 WB600 組成型表達
      2 pP43NMK 氨卞 BS168/WB800等 組成型表達
      3 pHT43 氨卞/氯霉素 BS168/WB800等 誘導表達
      4 其他

      服務承諾:
      1、基因合成和載體構建參見相關服務部分。
      2、本公司會在最短的時間內快速完成實驗,并為客戶提供足量蛋白以滿足科研需求。
      3、提供完整的實驗報告。
      4、提供合乎客戶要求量和純度的特定蛋白。

       

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