443143416服務價格及周期：
| 服務編號 | 服務內容 | 價格 | 服務周期 |
| MRNA-1 | 靶基因3′-UTR雙熒光素酶野生型載體（?1.5kb） | 1500元 | 1-2周 |
| MRNA-2 | 靶基因3′-UTR雙熒光素酶突變型載體(一個位點) | 900元 | 1-2周 |
| MRNA-3 | 質粒提?。▋蓚€靶基因加一個對照質粒） | 900元 | 1-2周 |
| MRNA-4 | miRNA表達載體或mimic與雙熒光素酶載體共轉染(96孔板），雙熒光素酶檢測 | 5000元 | 1-2周 |
microRNA靶基因驗證實驗概述
當前，microRNA對靶基因的功能研究十分熱門。利用熒光素酶報告基因檢測實驗尋找或驗證microRNA對靶點作用性是不可或缺的實驗技術。本公司可為您提供microRNA報告基因載體構建服務，并可進一步為您提供熒光素酶報告基因檢測實驗服務。您只需要提供目的microRNA靶位點序列，我們專業的技術服務人員就可替您完成載體構建，為您節省大量的時間和精力。
下圖為microRNA-reporter載體表達框架示意圖，具有多克隆位點，方便插入目的靶點序列。psiCHECK-2載體用于終點法的細胞裂解物檢測，包含螢火蟲熒光素酶基因，使海腎熒光素酶的表達水平歸一化，令該系統更可靠、重現性更好。使用psiCHECK-2載體時，由于是一個載體，無須通過共轉染進行歸一化。
microRNA報告基因實驗流程：
1.microRNA靶點的預測
利用Targetscan,miRanda,PicTar軟件得到目的microRNA的預測靶點序列。
2.獲得microRNA靶點序列
根據提供的靶序列，合成兩條互補的單鏈DNA模板?；蛘?，設計引物PCR擴增目的microRNA靶基因3’UTR序列，或直接合成。
3.microRNA靶序列克隆
將合成的兩條單鏈退火成雙鏈（具有粘性末端），或將PCR產物雙酶切，后連入經過同樣雙酶切的miR-reporter載體中，連接產物轉化大腸桿菌DH5α。
4.陽性克隆鑒定
挑選轉化的菌落，PCR篩選含有插入片段的陽性克隆，測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細胞轉染準備
將含目的microRNA靶基因的報告基因載體、內參質粒和microRNA mimics或microRNA negative control共轉染293T或Hela細胞。
6.熒光素酶檢測
共轉染細胞24-72h后，進行雙熒光素酶檢測，確定目的microRNA的靶基因。
整理分析數據，得出結論：
提供有microRNA靶序列的報告質粒，以及內參和對照質粒各一份。
甘油保存菌株各一支。
附mir-reporter載體的說明書
以及實驗報告：
包括載體構建過程，鑒定記錄，測序報告，細胞轉染，熒光檢測。